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m6A MeRIP 试剂盒
产品简介
m6A修饰是哺乳动物中最丰富的RNA表观修饰,同时也是第一个研究相对清楚的RNA表观修饰,其将表观遗传学的研究从基因组层面(DNA和组蛋白的修饰)推向到RNA层面,是生物学中的一个重要研究前沿和研究热点。
m6A MeRIP分析试剂盒使用RNA甲基化免疫沉淀的方法来识别广阔转录组中的m6A。在RNA甲基化免疫沉淀分析中,采用化学的方法使RNA片段化到100左右的核苷酸或更小的片段采用单克隆抗体使得有吸附力的磁珠用免疫沉淀反应将其指向m6A。在免疫沉淀反应之后,分离的 RNA片段采用qRT-PCR或RNA-测序(RNA-seq)来进行检测。
产品特点
此品非常适合从各种细胞、组织、哺乳动物、真菌、细菌、植物、血浆和血清等样本中提取的总RNA和polyA富集的RNA,进行特定基因RNA甲基化水平的定量分析。主要检测仪器:实时荧光定量PCR仪或测序仪。
注意事项
1.所有的耗材须用无RNA酶的耗材。本试剂盒的试剂均进行过去RNA酶处理。
2.所有操作尽量在冰上进行,以减少RNA的降解。
3.MeRIP对RNA损失较大,最后洗脱的RNA尽量用低浓度RNA提取试剂提取。
4.本试剂盒片段化时间为3min,片段化的RNA大小约为200-300nt (满足大部分实验要求) 。需要更小片段的RNA,可以将时间延长,最长不超过5min。
5.本试剂盒经优化可以进行低至1ug总RNA 进行MeRIP,但是如果目标RNA丰度较低,建议提高总的RNA用量。
参考文献
[1] Guo X, Li K, Jiang W, Hu Y, Xiao W, Huang Y,Feng Y, Pan Q, Wan R. RNA demethylase ALKBH5 prevents pancreatic cancer progression by posttranscriptional activation of PER1 in an m6A-YTHDF2-dependent manner. Mol Cancer. 2020 May 19;19(1):91.
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